厭氧袋的科學(xué)使用之道：開(kāi)啟無(wú)菌培養(yǎng)新篇
更新時(shí)間：2025-04-23 點(diǎn)擊次數(shù)：267次
在微生物培養(yǎng)與研究的世界里，厭氧袋扮演著至關(guān)重要的角色。它為厭氧微生物的生長(zhǎng)繁殖營(yíng)造了一個(gè)無(wú)氧的特殊環(huán)境，讓那些對(duì)氧氣敏感的微生物能夠在適宜的條件下茁壯成長(zhǎng)。以下是
厭氧袋的詳細(xì)使用方法。
使用厭氧袋前，準(zhǔn)備工作是關(guān)鍵。操作者需穿戴好實(shí)驗(yàn)服、手套與口罩，確保自身處于無(wú)菌狀態(tài)。同時(shí)，將實(shí)驗(yàn)所需的培養(yǎng)皿、接種環(huán)、鑷子等器材進(jìn)行嚴(yán)格滅菌處理，一般采用高壓蒸汽滅菌法，以殺滅可能存在的微生物，防止其污染培養(yǎng)環(huán)境。接著，準(zhǔn)備好適量的厭氧產(chǎn)氣包和指示劑，如甲基藍(lán)指示劑，它們將為后續(xù)判斷厭氧環(huán)境是否達(dá)標(biāo)提供直觀依據(jù)。
開(kāi)始操作時(shí)，先將經(jīng)過(guò)滅菌的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿中，待其冷卻凝固后備用。然后，在超凈工作臺(tái)中，用接種環(huán)挑取適量的待培養(yǎng)微生物菌種，迅速將其接種到準(zhǔn)備好的培養(yǎng)皿培養(yǎng)基上。接種完成后，立即將培養(yǎng)皿放入?yún)捬醮鼉?nèi)，同時(shí)放入?yún)捬醍a(chǎn)氣包和指示劑。
隨后，迅速密封厭氧袋。這一步驟至關(guān)重要，因?yàn)槿魏挝⑿〉穆舛伎赡苁雇饨缈諝膺M(jìn)入袋內(nèi)，破壞厭氧環(huán)境。在密封過(guò)程中，要確保厭氧袋的邊緣緊密結(jié)合，可使用熱封機(jī)或特殊的密封夾具進(jìn)行密封處理。密封完成后，輕輕搖晃厭氧袋，使產(chǎn)氣包內(nèi)的化學(xué)物質(zhì)充分混合并啟動(dòng)反應(yīng)。這些化學(xué)物質(zhì)通常包含鐵粉、活性炭、氯化鈉、水等成分，它們能夠通過(guò)化學(xué)反應(yīng)消耗袋內(nèi)的氧氣，產(chǎn)生二氧化碳和氫氣，從而營(yíng)造出厭氧環(huán)境。
將厭氧袋放入恒溫培養(yǎng)箱中，根據(jù)不同微生物的生長(zhǎng)需求設(shè)置合適的溫度，一般在30-37攝氏度之間。在培養(yǎng)過(guò)程中，要定期觀察厭氧袋內(nèi)指示劑的顏色變化。如果指示劑從藍(lán)色變?yōu)闊o(wú)色，說(shuō)明袋內(nèi)已達(dá)到厭氧狀態(tài)，微生物可以在這種低氧或無(wú)氧環(huán)境下正常生長(zhǎng)繁殖。
整個(gè)培養(yǎng)過(guò)程可能需要數(shù)天甚至數(shù)周時(shí)間，期間要保持厭氧袋的完整性和穩(wěn)定性，避免晃動(dòng)和碰撞。當(dāng)培養(yǎng)結(jié)束后，從恒溫箱中取出厭氧袋，可先通過(guò)觀察窗查看微生物的生長(zhǎng)情況。若需要進(jìn)行進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)分析，如涂片染色觀察、生化鑒定等，則在超凈工作臺(tái)中打開(kāi)厭氧袋，取出培養(yǎng)皿進(jìn)行后續(xù)操作。
