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zeta life 轉(zhuǎn)染MT-4人T淋巴細(xì)胞的步驟及注意事項(xiàng)
更新時(shí)間:2022-06-08   點(diǎn)擊次數(shù):538次

 

MT-4人T淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑可轉(zhuǎn)染極度難轉(zhuǎn)染的免疫細(xì)胞、懸浮細(xì)胞,如:T細(xì)胞、NK細(xì)胞、人淋巴細(xì)胞、THP-1等。

MT-4人T淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑

Zeta Life多肽小分子轉(zhuǎn)染試劑的尺寸大小是傳統(tǒng)脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑體積的1/10;

本轉(zhuǎn)染試劑是通過(guò)細(xì)胞主動(dòng)吞噬吸收進(jìn)入細(xì)胞;

本轉(zhuǎn)染試劑進(jìn)入后對(duì)細(xì)胞膜無(wú)物理性損傷,不易出現(xiàn)細(xì)胞變形,保持高的細(xì)胞活力;

不激活細(xì)胞表面或細(xì)胞體內(nèi)marker;

可反映真實(shí)的細(xì)胞通路蛋白原始數(shù)據(jù);

可轉(zhuǎn)染免疫細(xì)胞、懸浮細(xì)胞等。

注意事項(xiàng):

1、質(zhì)粒 DNA 必須溶解于無(wú)菌雙蒸水或超純水,但不能溶解于提取試劑盒提供的 Buffer。溶解于 Buffer 的質(zhì)粒轉(zhuǎn)染效率會(huì)下降 80%左右,甚至?xí)D(zhuǎn)染失敗。

2、質(zhì)粒必須去除內(nèi)毒素,內(nèi)毒素對(duì)細(xì)胞將產(chǎn)生很大的細(xì)胞毒性,會(huì)導(dǎo)致轉(zhuǎn)染效率下降 70%-80%左 右,甚至導(dǎo)致轉(zhuǎn)染失?。ㄍ扑]使用 Qiagen、TIANGEN、Omega 去內(nèi)毒素質(zhì)粒提取試劑盒)。

3、復(fù)合物的制備過(guò)程中是不能用其他任何試劑對(duì)核酸或轉(zhuǎn)染試劑進(jìn)行稀釋?zhuān)恍鑼⒑怂岷娃D(zhuǎn)染 試劑兩者按 1:1 比例直接混合,如果進(jìn)行了稀釋會(huì)導(dǎo)致轉(zhuǎn)染失。

4、轉(zhuǎn)染試劑與核酸混勻后用移液器吹打 10-15 次,室溫孵育 10-15 分鐘后即可加入細(xì)胞培養(yǎng)板。

5、轉(zhuǎn)染 24 小時(shí)后進(jìn)行正常換液,不能像 Lipo2000 一樣轉(zhuǎn)染 4-6 小時(shí)后換液。

6、原代細(xì)胞、免疫細(xì)胞轉(zhuǎn)染時(shí),細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基里面不能含有雙抗培養(yǎng)基。

產(chǎn)品說(shuō)明:

1、產(chǎn)品名稱(chēng)

Advanced DNA RNA Transfection Reagent

2、包裝規(guī)格

貨號(hào):AD600025 、AD600050、AD600075、AD600150

規(guī)格:0.25ml、0.5ml、0.75ml、1.5ml

3、儲(chǔ)存條件

常溫運(yùn)輸,4℃保存,可保存兩年,拒絕反復(fù)凍融。

 

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